技術(shù)簡介：
核酸和蛋白質(zhì)是組成生命的主要生物大分子，兩者的相互作用是構(gòu)成生命活動的生長、繁殖、運動、遺傳和代謝等生命活動的基礎(chǔ)。研究蛋白質(zhì)和核酸間的相互作用是人們探索生命現(xiàn)象奧秘的關(guān)鍵，CHIP檢測實驗是應(yīng)用于蛋白與核酸互作關(guān)系的重要參考。CHIP實驗在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，并將其隨機切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。將ChIP與第二代測序技術(shù)相結(jié)合的ChIP-Seq技術(shù)，能夠高效地在全基因組范圍內(nèi)檢測與組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等互作的DNA區(qū)段，研究體內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子和靶基因啟動子區(qū)域直接相互作用的方法，對于調(diào)控蛋白在基因組上的結(jié)合靶點篩選、差異化表觀遺傳變異的原理揭示提供了重要的解決思路。
實驗步驟：
Step1:細胞培養(yǎng)物交聯(lián)和樣品制備。
Step2:胞核制備和染色質(zhì)消化。
Step3:染色質(zhì)消化和濃度分析。
Step4:染色質(zhì)免疫沉淀法。
Step5:將染色質(zhì)從抗體/Protein G Magnetic Beads上洗脫下來并解交聯(lián)。
Step6:使用離心柱純化 DNA。
Step7:用PCR定量 DNA。
結(jié)果展示：
送樣要求：
目的基因或轉(zhuǎn)錄因子的相關(guān)背景資料。
動物：細胞系、低脂肪含量組織液氮速凍樣本（細胞數(shù)大于5×10
6個）。
抗體：進口IP級別抗體/非商業(yè)化標準抗體（需檢測）。
樣品運輸：干冰運輸，建議用滅菌的樣品袋或LoBind 管，parafilm將管口密封好。
實驗周期：2周
聯(lián)系方式：400-681-8582
