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熒光單標信號放大試劑盒

【產品原理】

酪酰胺信號放大(TSA，Tyramide signal amplification)技術是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶 蛋白進行標記的酶學檢測方法，類似常規(guī)免疫組化的 DAB顯色方法，TSA技術同樣采用 HRP標記的二抗，同樣有對應的“顯色 ”步驟（HRP 催化加入反應體系的酪胺熒光素底物，產生活化熒光底物，活化底物可與抗原上的酪氨酸等殘基共價結合，使樣品上穩(wěn)定的共價結合酪胺熒光素。之后用熱修復法洗去非共價結合的一抗-二抗-HRP復合物，重復下一種一抗-HRP 二抗來第二輪孵育，換另一種酪胺熒光素底物，如此往復就可實現多重標記。

TSA 詳細原理是利用酪胺 Tyramide 的過氧化物酶反應(酪胺鹽在 HRP 催化 H202 下形成共價鍵結合位點) ，產生大量的酶促產物，該產物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結合，這樣在抗原-抗體結合部位就有大量的熒光素沉積，結果使其檢測信號得到 10- 100 倍增強。簡單來說，用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的 HRP（而不是直接偶聯熒光素），來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在 HRP 和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結合。然后微波或煮沸或者水浴等熱修復處理，前一輪非共價結合的抗體被洗掉，共價結合的熒光素穩(wěn)定共價結合在樣本切片蛋白上。再換個一抗來第二輪孵育，周而復始。等到所有抗體孵育結束，熒光素都結合好后，最后去檢測結果。 由于每次體系中都只有單一抗體孵育，因此無需擔心抗體交叉反應， 以及一抗二抗種屬匹配問題，大大減少了實驗設計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。也就是說，如果用 TSA 技術，同一張片子上所有的靶標都可以選用特異性高的兔單克隆抗體。搭配同一支抗兔的多聚 HRP 二抗就可以進行實驗，而且信號放大的倍數大大增強。本公司開發(fā)的試劑盒具體酪胺熒光染料為以下其中一種或者多種：TYR-480，TYR-520， TYR-570 ，TYR-620 ，TYR-690 ，TYR-780 。此試劑盒中的熒光染料可單獨或配合使用�？梢詫崿F單標、雙標、三標以及更多重熒光放大/多重同源抗體熒光標記等功能，極大豐富了此試劑盒的內涵。

【產品規(guī)格】100T

【產品貨號】YB004

【儲存溫度】-20℃ , 一年有效

【產品組成】