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雙標多重免疫熒光試劑盒

【產(chǎn)品原理】

酪酰胺信號放大(TSA，Tyramide signal amplification)技術(shù)是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白進行標記的酶學檢測方法，類似常規(guī)免疫組化的 DAB 顯色方法，TSA 技術(shù)同樣采用 HRP 標記 的二抗，同樣有對應的“顯色 ”步驟（HRP 催化加入反應體系的酪胺熒光素底物，產(chǎn)生活化熒光底物，活化底物可與抗原上的酪氨酸等殘基共價結(jié)合，使樣品上穩(wěn)定的共價結(jié)合酪胺熒光素。之后用 熱修復法洗去非共價結(jié)合的一抗-二抗-HRP 復合物，重復下一種一抗-HRP 二抗來第二輪孵育，換另一種酪胺熒光素底物，如此往復就可實現(xiàn)多重標記。

TSA 詳細原理是利用酪胺 Tyramide 的過氧化物酶反應(酪胺鹽在 HRP 催化 H202 下形成共價鍵結(jié)合位點) ，產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物，該產(chǎn)物能與周圍的蛋白殘基(包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基)結(jié)合，這樣在抗原-抗體結(jié)合部位就有大量的熒光素沉積，結(jié)果使其檢測信號得到 10-100倍增強。簡單來說，用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的 HRP（而不是直接偶聯(lián)熒光素），來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在 HRP 和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波或煮沸或者水浴等熱修復處理，前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉，共價結(jié)合的熒光素穩(wěn)定共價結(jié)合在樣本切片蛋白上。再換個一抗來第二輪孵育，周而復始。等到所有抗體孵育結(jié)束，熒光素都結(jié)合好后，最后去檢測結(jié)果。 由于每次體系中都只有單一抗體孵育，因此無需擔心抗體交叉反應， 以及一抗二抗種屬匹配問題，大大減少了實驗設(shè)計時不同種屬抗體選擇匹配的限制。也就是說，如果用 TSA 技術(shù)，同一張片子上所有的靶標都可以  選用特異性高的兔單克隆抗體。搭配同一支抗兔的多聚 HRP 二抗就可以進行實驗，而且信號放大的  倍數(shù)大大增強。本公司開發(fā)的試劑盒具體酪胺熒光染料為以下其中一種或者多種：TYR-480，TYR-520， TYR-570 ，TYR-620 ，TYR-690 ，TYR-780 。此試劑盒中的熒光染料可單獨或配合使用。可以實現(xiàn)單標、雙標、三標以及更多重熒光放大/多重同源抗體熒光標記等功能，極大豐富了此試劑盒的內(nèi)涵。

【產(chǎn)品規(guī)格】100T

【產(chǎn)品貨號】YB005

【儲存溫度】-20℃ , 一年有效

【產(chǎn)品組成】