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淋巴細(xì)胞分離液 1.077（通用型）

淋巴細(xì)胞分離液 1.077（通用型） 貨號(hào)：U22-420B 規(guī)模：

貨號(hào)：U22-420B
檢測(cè)物種：
應(yīng)用范圍： 細(xì)胞培養(yǎng)
產(chǎn)品類型：
保存溫度： 常溫保存，兩年有效；拆封后請(qǐng)置于 4℃避光保存，一個(gè)月內(nèi)使用
產(chǎn)地： YOBIBIO
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【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】： 本產(chǎn)品是一種用于分離淋巴細(xì)胞的無(wú)菌、低內(nèi)毒素水平的密度梯度分離液。人血中紅細(xì)胞 和粒細(xì)胞密度較大，為 1.090 g/mL 左右，淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞密度為 1.075~1.090 g/mL，血小 板為 1.030~1.035 g/mL。為此利用一種密度介于 1.075～1.092 之間而近于等滲的溶液做密度梯 度離心，使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，從而將各種血細(xì)胞加以分離。
【操作方法】（常規(guī)方法，僅供參考）：
1、用 2-4 倍體積生理鹽水、PBS 或 Hank’s 等無(wú)菌稀釋液稀釋血液樣品。
2、在離心管中加入 15-20mL 分離液，小心將稀釋后的血樣 20-30mL 平鋪到分離液液面上 方。
3、室溫離心 400 g，15-30 min。
4、離心結(jié)束后，此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分四層：第一層為血漿層，第二層為環(huán)狀乳 白色淋巴細(xì)胞（目的細(xì)胞），第三層為透明分離液層，第四層為紅細(xì)胞層。
5、小心吸取第二層細(xì)胞到另一離心管中，加入三倍體積的生理鹽水、PBS 或 Hank’s 液等 無(wú)菌稀釋液混勻，300g，離心 10min，棄上清。
6、為了去除殘余血小板，可將細(xì)胞重懸于 30-50mL 生理鹽水、PBS 或 Hank’s 液等無(wú)菌 稀釋液中，室溫 200g 離心 10-15 分鐘，小心棄掉上清。
7、可選擇性地重復(fù)第 6 步，將會(huì)去除絕大部分血小板。
8、用適當(dāng)體積的后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸目的細(xì)胞，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
【注意事項(xiàng)】：
1、在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均應(yīng)在 22±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得最佳的實(shí) 驗(yàn)結(jié)果，最好在取血 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液存放時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)胞分離效果越差。血液放置超過(guò) 6h 后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。
2、本實(shí)驗(yàn)最好不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無(wú)靜電、低靜電 離心管及未經(jīng)堿處理過(guò)后的玻璃制品，因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面會(huì)變 成毛面，影響細(xì)胞分離效果。
3、吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的 粒細(xì)胞數(shù)量增加；吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。
4、因血液樣本的個(gè)體差異及血液粘度不同，使用本試劑得到的分離效果也會(huì)有一定差異， 可根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整離心力及離心時(shí)間，離心力最大不超過(guò) 1000g。
保存條件： 常溫保存，兩年有效；拆封后請(qǐng)置于 4℃避光保存，一個(gè)月內(nèi)使用。
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