0.25%胰蛋白酶消化液(溶于PBS,不含EDTA,不含酚紅) 貨號(hào):U31-325C 規(guī)模:
操作說(shuō)明
貼壁細(xì)胞
1. 吸去細(xì)胞培養(yǎng)液,用無(wú)菌的PBS或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞去除殘余的血清。
2. 加入適量本產(chǎn)品覆蓋細(xì)胞,室溫靜置消化1-5 min。
3. 顯微鏡下觀察,當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)明顯收縮(用移液槍輕輕吹打細(xì)胞較容易將細(xì)胞吹打下來(lái)),吸除胰酶細(xì)胞消化液,加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,即可直接傳代培養(yǎng)。如果用移液槍輕輕吹打時(shí)很難使細(xì)胞從板底脫落,表明消化時(shí)間不夠,可加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。注意避免過(guò)度消化
注意事項(xiàng)
1. 由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同,實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)依據(jù)具體情況,確定最佳消化時(shí)間;消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況。
2. 本產(chǎn)品不含抑菌劑,在使用過(guò)程中要特別注意無(wú)菌操作,避免消化液被微生物污染。
3. 本產(chǎn)品不宜4℃長(zhǎng)期保存,避免反復(fù)凍融,建議分裝成小份后-20℃保存。
4. 對(duì)于胰酶中EDTA、酚紅的選擇,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,對(duì)于一般的腫瘤細(xì)胞,選擇含EDTA的胰酶消化液。對(duì)于較敏感、脆弱的細(xì)胞,例如原代細(xì)胞及很容易消化的細(xì)胞,選擇不含EDTA的胰酶消化液,如果細(xì)胞特別敏感,需要選擇胰蛋白酶濃度更低的消化液。如果是需要用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡,則選用不含EDTA的胰酶消化液。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。